Technical tips

icon 効率の高いPCRクローニング用ベクターとその利用法

PCR 産物のTA-クローニングと平滑末端クローニングのために、3種類の便利なベクターを開発しました。
Addgene (http://www.addgene.org/)より入手できます。
 A series of high-efficiency PCR-cloning vectors and their useful application (in English)

icon SLiCE (Seamless Ligation Cloning Extract) from Escherichia coli laboratory strains

研究室で使用されるEscherichia coli株の粗抽出液を使用した高効率、低コストのSeamless cloning方法を紹介しています。
また、SLiCE法を応用して、簡単に部位特異的突然変異体を作成する方法 (SLiCE-mediated PCR-based site-directed mutagenesis (SLiP site-directed mutagenesis))についても、紹介しています。
 SLiCE from Escherichia coli laboratory strains (in English)

icon 組換えタンパク質発現効率の改善 ~翻訳開始領域コドン置換による~
大腸菌での組換えタンパク質発現効率を改善するひとつの方法を紹介しています。
組換えタンパク質のN末端アミノ酸配列である翻訳開始領域下流のコドンをサイレント変異でA/T-richへ置換することで、組換えタンパク質の発現を向上させることができます。
Method for enhancement of recombinant protein expression in Escherichia coli (in English)
icon Preparative disk gel電気泳動装置を用いた封入体(inclusion body)からの抗原調製
封入体(inclusion body)で発現したタンパク質から抗原を調製するために、Preparative disk gel電気泳動が便利です。
 Preparative disk gel electrophoresis for antigen preparation from inclusion bodies (in English)
icon 電気泳動ゲル撮影装置(自作)
 DNAアガロースゲルの撮影用に電気泳動ゲル撮影装置システムを自分で作成しました。そのときの情報を、参考までに掲載しています。
 
icon 96ウェルプレート用手動遠心機(Manual centrifuge equipment for 96-well PCR paltes)
96ウェルプレート(96-well PCR plate)をスピンダウンするための遠心機を、サラダスピナー(salad spinner)を用いて作成しました。
Manual centrifuge equipment for 96-well PCR plates (in English)
 
         
 
 
 
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